Клональное микроразмножение Coelogyne mooreana Sander ex Rolfe

Целогина Мура (Coelogyne mooreana Sander ex Rolfe) – представитель семейства Orchidaceae, редкий и эндемичный вид флоры Вьетнама, характеризуется высокой декоративностью и называется «королевой» рода Coelogyne благодаря крупным, белым и ароматным цветкам, украшенным желтой полоской посередине губы. Цель исследований – разработка протокола клонального микроразмножения C. mooreana путем модификации питательной среды с использованием органических добавок и регуляторов роста. Для исследований использовали незрелые семена, собранные из нераскрывшихся плодов, через 6 месяцев после искусственного (ксеногамного) опыления. Исследования состояли из нескольких этапов: aсимбиотический посев семян, рост и развитие протокормов, формирование проростков и их укоренение. На этапе aсимбиотического посева семян максимальная всхожесть, составлявшая 93%, зафиксирована на питательной среде Гамборга (B5) с добавлением 0,5 мг/л 6-бензиламинопурина (6-БАП). Наиболее интенсивное образование адвентивных побегов наблюдали на питательной среде Мурасиге-Скуга ½ MS), содержащей органические добавки без регуляторов роста (5,64 и 4,56 шт. соответственно). Оптимальный процесс развития протокормов и образования проростков отмечен на питательной среде ½ MS с добавлением 0,5 мг/л 6-БАП и 100 мл/л кокосовой воды. На этапе укоренения наиболее эф- фективной оказалась питательная среда ½ MS с добавлением 0,5 мг/л индолил-3-масляной кислоты (ИМК) и 100 мл/л кокосовой воды, что способствовало формированию развитой корневой системы: процент укоренения – 96,7%; число корней – 5,05±0,36 шт/эксплант; длина корней – 2,43±0,05 см; длина растений – 5,95±0,24 см. Проростки, высаженные в субстрат, состоящий из коры, торфа и перлита в соотношении 1:1:1, характеризовались высокой жизнеспособностью при адаптации к условиям ex vitro. Впервые для C. mooreana разработан протокол клонального микроразмножения на всех этапах. Полученные результаты могут быть рекомендованы для сохранения и массового размножения этого редкого и ценного вида.

1. Khasim S.M., Hegde S.N., González-Arnao M.T., Thammasiri K. Orchid Biology: Recent Trends & Challenges. Singapore, Singapore: Springer, 2020:547. https://doi.org/10.1007/978-981-32-9456-1

2. Ai Y.Y., Liu Q., Hu H.X. et al. Terrestrial and Epiphytic Orchids Exhibit Different Diversity and Distribution Patterns Along an Elevation Gradient of Mt. Victoria, Myanmar. Global Ecology and Conservation. 2023;42: e02408. https://doi.org/10.1016/j.gecco.2023.e02408

3. Коровкин О.А., Черятова Ю.С. Ботаника: Учебник. Москва: КноРус, 2024. 464 с. EDN: CBVVAR

4. Черятова Ю.С. Эволюционно-экологические адаптации и биосферная роль растений // Биосферное хозяйство: теория и практика. 2022. № 10 (51). С. 45-49. EDN: XPBCYE

5. Djordjević V., Tsiftsis S. The Role of Ecological Factors in Distribution and Abundance of Terrestrial Orchids. Brno, Czech Republic: Springer International Publ., 2022;71. https://doi.org/10.1007/978-3-030-11257-8_4-1

6. Shefferson R.P., Jacquemyn H., Kull T., Hutchings M.J. The Demography of Terrestrial Orchids: Life History, Population Dynamics and Conservation. Botanical Journal of the Linnean Society. 2020;192(2):315-332. https://doi.org/10.1093/botlinnean/boz084

7. Clayton D. The Genus Coelogyne. A Synopsis. Borneo: Natural History Publications; Kew: The Royal Botanic Gardens, 2002:305

8. Chase M.W., Gravendeel B., Sulistyo B.P., Wati R.K. Expansion of the Orchid Genus Coelogyne (Arethuseae; Epidendroideae) to Include Bracisepalum, Bulleyia, Chelonistele, Dendrochilum, Dickasonia, Entomophobia, Geesinkorchis, Gynoglottis, Ischnogyne, Nabaluia, Neogyna, Otochilus, Panisea and Pholidota. Phytotaxa. 2021:94-134. https://doi.org/10.11646/phytotaxa.510.2.1

9. Yeung E.C. The Orchid Embryo – « An Embryonic protocorm». Botany. 2022;100(9):691-706. https://doi.org/10.1139/cjb-2022-0017

10. Kolomeitseva G.L., Koval V.A., Ryabchenko A.S., Babosha A.V. Megasporogenesis and Megagametogenesis in Coelogyne speciosa subsp. Fimbriata (J.J.Sm.) Gravendeel (Orchidaceae Juss.). Int. J. Plant Biol. 2023;14:190-198. https://doi.org/10.3390/ijpb14010016

11. Коломейцева Г.Л., Цавкелова Е.А., Гусев Е.М. и др. О симбиозе некоторых орхидей и активного штамма бактерии Bacillus pumilus в культуре in vitro // Бюллетень Главного ботанического сада. 2002. Вып. 183. С. 117-126

12. Широков А.И., Коломейцева Г.Л., Буров А.В., Каменева Е.В. Культивирование орхидей европейской России: Монография. Нижний Новгород, 2005. 64 с.

13. Орлова Н.Д., Молканова О.И., Коновалова Т.Ю., Яценко И.О. Особенности регенерации Decaisnea fargesii Franch. в культуре in vitro // Таврический вестник аграрной науки. 2024. № 1 (37). С. 125-135. https://doi.org/10.5281/zenodo.10930671

14. Татаренко И.В. Микориза орхидных (Orchidaceae) Приморского края // Ботанический журнал. 1995. Т. 80, № 8. С. 64-72

15. Большакова Е.В., Емельянова И.С., Лукаткин А.С., Мокшин Е.В. Влияние питательных сред на морфогенез Vanda hybrid и Anoectochilus roxburghii // Международная научно-практическая конференция «Наука сегодня: опыт, традиции, инновации». 26 июля 2017 г. Вологда: Маркер, 2017. С. 8-10. EDN: ZCBIUD

16. Вельмяйкин И.Н., Мокшин Е.В., Лукаткин А.С. Влияние регуляторов роста на размножение и рост побегов Cymbidium hybridum Hort. in vitro // Вестник Нижегородского университета имени Н.И. Лобачевского. 2013. № 3-1. С. 133-137. EDN: RAPWSR

17. Хуссиен М., Коновалова Т.Ю., Молканова О.И. Клональное микроразмножение представителей рода Dactylorhiza Neck. ex Nevski // АгроЭкоИнфо. 2021. № 4. https://doi.org/10.51419/20214417

18. Hussien M., Molkanova O.I., Raeva-Bogoslovskaya E.N., Makarov S.S. Plant Growth Regulators and Organic Additives on the Proliferation of Protocorm-like Bodies and Plantlet Regeneration of Cattleya gaskelliana (N.E.Br.) B.S. Williams. Agricultural Sciences (Ciência e Agrotecnologia). 2024;48: e018223. https://doi.org/10.1590/1413-7054202448018223

19. Хуссиен М., Молканова О.И., Орлова Е.Е., Коваль В.А. Совершенствование методики укоренения Cattleya gaskelliana (N.E.Br.) B.S. Williams (Orchidaceae Juss.) в условиях in vitro // Известия Российской академии наук. Серия биологическая. 2025. № 1. С. 35-43. https://doi.org/10.31857/S1026347025010045

20. Выращивание лесных ягодных растений в условиях in vitro. Лабораторный практикум: Учебное пособие / Сост. С.С. Макаров, Е.А. Калашникова, И.Б. Кузнецова, Р.Н. Киракосян. Караваево: Костромская ГСХА, 2019. 48 с. EDN: BPBDSP

21. Макаров С.С., Антонов А.М., Куликова Е.И. и др. Биотехнология в садоводстве. Выращивание плодовых и редких ягодных растений в культуре in vitro. Лабораторный практикум: Учебное пособие. Санкт-Петербург: Лань, 2023. 128 с. EDN: DLFKUD

22. Utami E.S.W., Hariyanto S. Organic Compounds: Contents and Their Role in Improving Seed Germination and Protocorm Development in Orchids. International Journal of Agronomy. 2020;2020(1):2795108. https://doi.org/10.1155/2020/2795108

23. Huh Y.S., Lee J.K., Nam S.Y. et al. Improvement of Asymbiotic Seed Germination and Seedling Development of Cypripedium macranthos Sw. with Organic Additives. Journal of Plant Biotechnology. 2016;43(1):138-145. https://doi.org/10.5010/JPB.2016.43.1.138

24. Salsabila S.N., Fatimah K., Noorhazira S. et al. Effect of Coconut Water and Peptone in Micropropagation of Phalaenopsis amabilis (L.) Blume Orchid. In: IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. 2022;1102(1):012002. https://doi.org/10.1088/1755-1315/1102/1/012002

25. Dewir Y.H., El-Mahrouk M.E., Murthy H.N., Paek K.Y. Micropropagation of Cattleya: Improved In Vitro Rooting and Acclimatization. Horticulture, Environment, and Biotechnology. 2015;56:89-93. https://doi.org/10.1007/s13580-015-0108-z

26. Hussien M., Molkanova O., Mitrofanova I.V. Micropropagation of Trichopilia suavis Lindl. & Paxton. Ornamental Horticulture. 2023;29:365-374. https://doi.org/10.1590/2447-536X.v29i3.2653

27. Nabieva A.Y. Asymbiotic Seed Germination and In Vitro Seedling Development of Orchis militaris, an Endangered Orchid in Siberia. Journal of Genetic Engineering and Biotechnology. 2021;19(1):122. https://doi.org/10.1186/s43141-021-00223-1

28. Jagiełło-Kubiec K., Nowakowska K., Łukaszewska A.J., Pacholczak A. Acclimation to Ex Vitro Conditions in Ninebark. Agronomy. 2021;11(4):612. https://doi.org/10.3390/agronomy11040612

29. Sanghamitra M., Babu J.D., Bhagavan B.V.K., et al. Standardization of Different Potting Media on Physiological Growth, Yield and Vase Life of Dendrobium Orchid cv. Sonia 17 under Shade Net Conditions in High Altitude Tribal Zone of Andhra Pradesh. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry. 2019;8(5):128-132.