Особенности транспортировки и созревания in vitro ооцит-кумулюсных комплексов крупного рогатого скота

Исследования направлены на оценку и оптимизацию методов транспортировки яичников крупного рогатого скота, а также методов созревания ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК) для последующего экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и культивирования эмбрионов до стадии бластоцисты in vitro. Апробированы температурные режимы транспортировки яичников при температуре +4°C и +37,5°C, а также 3 системы in vitro созревания – in vitro maturation (IVM) ооцитов крупного рогатого скота с использованием питательных сред промышленного производства для культивирования предимплантационных эмбрионов: BOIVM (IVF-Bioscience), Continuous Single Culture Complete (CSCM–C) with Gentamicin and HSA (Irvine Scientific) с добавлением 50 мкг/мл хорионического гонадотропина человека и 5 мкг/мл фолликулостимулирующего гормона, а также метод CAPA-IVM (capacitation IVM) с добавлением в среду CSCM–C1мМ N6,2ʹ-O-дибутириладенозин 3′,5′-цикломонофосфата и 0,5мМ 3-изобутил-1-метилксантина. По результатам сравнения режима транспортировки при температуре +4°C и +37,5°C были получены сопоставимые результаты. Уровень дозревания ооцитов методом CAPA-IVM на среде CSCM–C составил 52,4%, уровень формирования бластоцист – 14,8%, что сопоставимо с результатами контрольной группы на среде, разработанной для созревания, оплодотворения и культивирования эмбрионов крупного рогатого скота: BO-IVM/BO-IVF/BO-IVC (IVF-Bioscience) – 36,2 и 18,8% соответственно. Таким образом, метод CAPA-IVM, по результатам наших исследований, представляется перспективным для использования во вспомогательных репродуктивных технологиях крупного рогатого скота.

1. Gilchrist R.B., Smitz J. Oocyte in vitro maturation: physiological basis and application to clinical practice. Fertil Steril. 2023;119(4):524-539. https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2023.02.010

2. Никитин Г.С. Современные подходы при получении и криоконсервации эмбрионов крупного рогатого скота in vitro // Международный вестник ветеринарии. 2021. № 3. С. 192-205. https://doi.org/10.17238/issn2072-2419.2021.3.192

3. Yang H., Kolben T., Meister S., Paul C., et al. Factors Influencing the In Vitro Maturation (IVM) of Human Oocyte. Biomedicines. 2021;9(12):1904. https://doi.org/10.3390/biomedicines9121904

4. Михайлова Н.Д., Мишиева Н.Г., Кириллова А.О., Мартазанова Б.А. и др. Дозревание ооцитов in vitro. // Акушерство и гинекология. 2021. № 11. С. 64-70. https://dx.doi.org/10.18565/aig.2021.11.64-70

5. Ji K., Park K., Kim D., Kim E., Kil T., Kim M. Accomplishment of canine cloning through in vitro matured oocytes: a pioneering milestone. J Anim Sci Technol. 2024;66(3):577-586. https://doi.org/10.5187/jast.2024.e18

6. Shani A.K., Haham L.M., Balakier H., Kuznyetsova I. et al. The developmental potential of mature oocytes derived from rescue in vitro maturation. Fertil Steril. 2023;120(4):860-869. https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2023.05.163

7. Strączyńska P., Papis K., Morawiec E., Czerwiński M. et al. Signaling mechanisms and their regulation during in vivo or in vitro maturation of mammalian oocytes. Reprod Biol Endocrinol. 2022;20(1):37. https://doi.org/10.1186/s12958-022-00906-5

8. Leal G.R., Monteiro C.A.S., Carvalheira L.R., Souza-Fabjan J.M.G. The Simulated Physiological Oocyte Maturation (SPOM) system in domestic animals: A systematic review. Theriogenology. 2022; 188:90-99. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2022.05.023

9. Zhao Y., Liao X., Krysta A.E., Bertoldo M.J. et al. Capacitation IVM improves cumulus function and oocyte quality in minimally stimulated mice. J. Assist. Reprod. Genet. 2020; 37(1): 77-88. https://doi.org/10.1007/s10815-019-01610-x

10. Макутина В.А., Кривоногова А.С., Донник И.М., Исаева А.Г. Time-lapse культивирование in vitro эмбрионов крупного рогатого скота до стадии бластоцисты // Вестник КрасГАУ. 2025. № 3 (216). С. 106-117. https://doi.org/10.36718/1819-4036-2025-3-106-117

11. Souza-Fabjan J.M.G., Leal G.R., Monteiro C.A.S., Batista R.I.T.P., Barbosa N.O., Freitas V.J.F. In vitro embryo production in small ruminants: what is still missing? Anim Reprod. 2023;20(3): e20230055. https://doi.org/10.1590/1984-3143-AR2023-0055

12. Bongkoch Turathum, Er-Meng Gao, Ri-Cheng Chian. The Function of Cumulus Cells in Oocyte Growth and Maturation and in Subsequent Ovulation and Fertilization. Cells. 2021;10(9):2292. https://doi.org/10.3390/cells10092292

13. Martinez C.A., Rizos D., Rodriguez-Martinez H., Funahashi H. Oocyte-cumulus cells crosstalk: New comparative insights. Theriogenology. 2023;205:87-93. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2023.04.009

14. Strączyńska P., Papis K., Morawiec E., Czerwiński M. et al. Signaling mechanisms and their regulation during in vivo or in vitro maturation of mammalian oocytes. Reprod Biol Endocrinol. 2022;20(1):37. https://doi.org/10.1186/s12958-022-00906-5

15. Torkashvand H., Shabani R., Amiri I., Darakhshan R. et al. Exploring the Potential of In vitro Maturation (IVM) of Oocytes: Indications, Applications, and Treatment Protocols. Avicenna J Med Biotechnol. 2024;16(3):156-164. https://doi.org/10.18502/ajmb.v16i3.15741