izvestiiatimacadИзвестия Тимирязевской сельскохозяйственной академииIZVESTIYA OF TIMIRYAZEV AGRICULTURAL ACADEMY0021-342XФГБОУ ВО РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева10.26897/0021-342X-2024-3-63-77izvestiiatimacad-624Research ArticleГЕНЕТИКА, БИОТЕХНОЛОГИЯ, СЕЛЕКЦИЯ И СЕМЕНОВОДСТВОGENETICS, BIOTECHNOLOGY, BREEDING AND SEED PRODUCTIONФакторы индукции гиногенеза огурца (Cucumis sativus L.) в культуре семязачатковFactors affecting gynogenesis induction in cucumber (Cucumis sativus L.) through ovary culturehttps://orcid.org/0000-0003-0603-6293ОсмининаЕ. В.OsmininaE. V.

Осминина Екатерина Васильевна,  ассистент кафедры ботаники, селекции и семеноводства садовых растений

127550,  г.  Москва,  ул.  Тимирязевская,  49

тел.: (499) 976–41–71

Ekaterina V.  Osminina, Assistant  at  the  Department  of  Botany,  Plant Breeding and  Seed  Technology

49 Timiryazevskaya St., Moscow, 127550

katharina.osminina@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-9160-1164ВишняковаА. В.VishnyakovaA. V.

Вишнякова  Анастасия  Васильевна,   канд.  с.-х.  наук,  доцент  кафедры ботаники,  селекции  и  семеноводства  садовых  растений

127550,  г.  Москва,  ул.  Тимирязевская,  49

тел.: (499) 976–41–71

Anastasiya V.  Vishnyakova,   CSc  (Agr), Associate  Professor  at  the Department of Botany, Plant Breeding and Seed Technology

49 Timiryazevskaya St., Moscow, 127550

a.vishnyakova@rgau-msha.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0657-8797ЭйдлинЯ. Т.EydlinYa. T.

Эйдлин Яков Тарасович, ассистент кафедры ботаники, селекции и семеноводства садовых растений

127550,  г.  Москва,  ул.  Тимирязевская,  49

тел.:  (499) 976–41–71

Yakov  T.  Eydlin,  Assistant  at  the  Department  of  Botany,  Plant  Breeding and  Seed  Technology

49 Timiryazevskaya St., Moscow, 127550

ya.eidlin@rgau-msha.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8013-0731МурзинаЭ. Р.MurzinaE. R.

Мурзина Эльвира Рафаэлевна, ассистент кафедры ботаники, селекции и семеноводства садовых растений

127550,  г.  Москва,  ул.  Тимирязевская,  49

тел.: (499) 976–41–71

Elvira R.  Murzina,   Assistant  at  the  Department  of  Botany,  Plant  Breeding and  Seed  Technology

49 Timiryazevskaya St., Moscow, 127550

e.murzina@rgau-msha.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0297-500XМироновА. А.MironovA. A.

Миронов  Алексей  Александрович,  канд.  с.-х.  наук,  доцент  кафедры ботаники,  селекции  и  семеноводства  садовых  растений

127550,  г.  Москва,  ул.  Тимирязевская,  49

тел.: (499) 976–41–71

Aleksey A.  Mironov,  CSc  (Ag),  Associate  Professor,  Associate  Professor at the Department of Botany, Plant Breeding and Seed Technology

49 Timiryazevskaya St., Moscow, 127550

a.mironov@rgau-msha.ruЛисоваяД. Д.LisovayaD. D.

Лисовая Дарья Дмитриевна, ассистент кафедры ботаники, селекции и семеноводства садовых растений

127550,  г.  Москва,  ул.  Тимирязевская,  49

тел.: (499) 976–41–71

Daria D.  Lisovaya,  Assistant  at  the  Department  of  Botany,  Plant  Breeding and  Seed  Technology

49 Timiryazevskaya St., Moscow, 127550

d.lisovaya@rgau-msha.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9404-8862МонахосС. Г.MonakhosS. G.

Монахос  Сократ  Григорьевич,  д-р  с.-х.  наук,  профессор,  заведующий  кафедрой  ботаники,  селекции  и  семеноводства  садовых  растений

127550,  г.  Москва,  ул.  Тимирязевская,  49

тел.: (499) 976–41–71

Sokrat  G. Monakhos, DSc (Agr), Professor, head of the Department Botany, Plant Breeding and Seed Technology

49 Timiryazevskaya St., Moscow, 127550

phone: (499) 976–41–71

s.monakhos@rgau-msha.ruРоссийский государственный аграрный университет – МСХА имени К.А. ТимирязеваРоссияRussian State Agrarian University – Moscow Timiryazev Agricultural AcademyRussian Federation202424042024136377Copyright © Осминина Е.В., Вишнякова А.В., Эйдлин Я.Т., Мурзина Э.Р., Миронов А.А., Лисовая Д.Д., Монахос С.Г., 20242024Осминина Е.В., Вишнякова А.В., Эйдлин Я.Т., Мурзина Э.Р., Миронов А.А., Лисовая Д.Д., Монахос С.Г.Osminina E.V., Vishnyakova A.V., Eydlin Y.T., Murzina E.R., Mironov A.A., Lisovaya D.D., Monakhos S.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://izvestiia.timacad.ru/jour/article/view/624

Повышение эффективности технологии производства удвоенных гаплоидов является актуальной задачей в целях расширения возможностей фундаментальных исследований и повышения темпов селекции коммерческих F1-гибридов. В данном исследовании изучено влияние  компонентов  индукционной  питательной  среды,  гидролизата  казеина  250  мг/л, 500 мг/л, глутатиона 10 мг/л, сочетания регуляторов роста TDZ 0,04 мг/л, 2,4-D0,15 мг/л на гиногенную отзывчивость огурца в культуре неоплодотворенных семязачатков. У 2 образцов показано повышение частоты гиногенной индукции семязачатков более чем в 2 раза при культивировании на индукционной питательной среде, дополненной 250 мг/л гидролизата казеина. Добавление в питательную среду 10 мг/л глутатиона способствует повышению частоты гиногенной индукции семязачатков в 1,5–2 раза у 3 образцов из 6. Сочетание регуляторов роста TDZ 0,04 мг/л, 2,4-D0,15 мг/л повышает частоту гиногенной индукции семязачатков в 1,5–2 раза у 2 образцов из 6. Установлено, что культивирование фрагментов завязи огурца на питательной среде, дополненной 0,5 мг/л путресцина, приводит к резкому снижению частоты гиногенной индукции семязачатков. Полученные данные о влиянии компонентов индукционной питательной среды в культуре семязачатков могут быть использованы для оптимизации технологии производства удвоенных гаплоидов огурца.

Improving the efficiency of doubled haploid technology is an urgent task to expand the possibilities of fundamental research and to increase the selection rate of commercial F1 hybrids. This study investigated the effect of the components of the induction nutrient medium: casein hydrolyzate ( 250 mg/l and 500 mg/l ) , glutathione  ( 10 mg/l) , a combination of growth regulators TDZ  ( 0.04 mg/l)  and 2,4-D ( 0.15 mg/l)  on the gynogenic response of cucumber in unfertilized ovules culture. The results showed that the addition of 250 mg/l of casein hydrolysate to the induction medium resulted in a more than twofold increase in the frequency of gynogenic ovules in two samples. The addition of 10 mg/l of glutathione to the induction medium helps to increase the frequency of gynogenic ovules by 1.5 to 2 times in 3 out of 6 samples. The results showed that cultivation of cucumber ovary fragments on the induction medium supplemented with 0.5 mg/l of putrescine leads to decrease in frequency of gynogenic ovules. The obtained data on the influence of the components of the induction medium in the culture of ovules can be used to optimize the technology for the production of doubled haploids in cucumber.

огурецCucumis sativus L.гиногенезудвоенные гаплоидыкультура семязачатковчастота гиногенной индукцииcucumberCucumis sativus L.gynogenesisdoubled haploidsovule culturefrequency of gynogenic inductionРабота выполнена при поддержке Министерства науки и высшего образования Российской Федерации в соответствии с соглашением 075–15–2023–220 на поддержку программы развития университета «Приоритет -2030».ReferencesВишнякова А.В., Александрова А.А., Монахос С.Г. Факторы прямого прорастания микроспорогенных эмбриоидов Brassica Napus L. // Известия ТСХА. – 2022. – № 6. – С. 43–53.Vishnyakova A.V., Aleksandrova A.A., Monakhos S.G. Factors of direct germination of microspore derived embryos of Brassica napus L. Izvestiya of Timiryazev Agricultural Academy (TAA). 2022;1(6):43–53. (In Russ.) https://doi.org/10.26897/0021-342X‑2022-6-43-53Григолава Т.Р., Вишнякова А.В., Синицына А.А. и др. Методические подходы создания удвоенных гаплоидов сахарной и столовой свеклы (Beta vulgaris L.) // Вавиловский журнал генетики и селекции. – 2021. – Т. 25, № 3. – С. 276–283.Grigolava T.R., Vishnyakova A.V., Sinitsyna A.A., Voronina A.V. et al. Methodological approaches for producing doubled haploids in sugar beet and red beet (Deta vulgaris L.). Vavilov Journal of Genetics and Breeding. 2021;25(3):276–283. (In Russ.) https://doi.org/10.18699/VJ21.031Домблидес Е.А., Шмыкова Н.А., Белов С.Н. и др. Получение DH-растений огурца (Cucumis sativus L.) в культуре неопыленных семяпочек in vitro // Овощи России. – 2019. – № 6. – С. 3–9.Domblides E.A., Shmykova N.A., Belov S.N., Korottseva I.B., Soldatenko A.V. DH-plant production in culture of unpollinated ovules of cucumber (Cucumis sativus L.). Vegetable crops of Russia. 2019;(6):3–9. (In Russ.) https://doi.org/10.18619/2072-9146-2019-6-3-9Осминина Е.В., Монахос С.Г. Особенности индукции гиногенеза в культуре изолированных семязачатков и фрагментов завязи Cucumis sativus L. // Материалы Международной научной конференции молодых ученых и специалистов, посвященной 135-летию со дня рождения А.Н. Костякова (г. Москва, 6–8 июня 2022 г.). – М.: РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева, 2022. – Т. 2. – С. 301–304.Osminina E.V., Monahos S.G. Peculiarities of gynogenesis induction in culture of isolated seed bracts and ovary fragments of Cucumis sativus L. Mezhdunarodnaya nauchnaya konferentsiya molodykh uchyonykh i spetsialistov, posvyashchyonnaya 135-letiyu so dnya rozhdeniya A.N. Kostyakova. June 06–08, 2022. Moscow, Russia: Russian State Agrarian University-Moscow Agricultural Academy named after K.A. Timiryazev, 2022;2:301–304. (In Russ.)Шмыкова Н.А., Химич Г.А., Коротцева И.Б., Домблидес Е.А. Перспективы получения удвоенных гаплоидов растений семейства Cucurbitaceae // Овощи России. – 2015. – № 3–4. – С. 28–31.Shmykova N.A., Khimich G.A., Korotseva I.B., Domblides E.A. Prospective of development of doubled haploid plants of Cucurbitaceae family. Vegetable crops of Russia. 2015;(3–4):28–31. (In Russ.) https://doi.org/10.18619/2072-9146-2015-3-4-28-31Ahmad N., Anis M. In Vitro Mass Propagation of Cucumis sativus L. from Nodal Segments // Turkish Journal of Botany. – 2005. – Vol. 29, № 3. – Pр. 237–240.Ahmad N., Anis M. In Vitro Mass Propagation of Cucumis sativus L. from Nodal Segments // Turkish Journal of Botany. – 2005. – Vol. 29, № 3. – Pр. 237–240.Baktemur G., Keles D., Kara E. et al. Effects of Genotype and Nutrient Medium on Obtaining Haploid Plants through Ovary Culture in Cucumber // Molecular Biology Reports. – 2022. – Vol. 49, № 6. – Pр. 5451–5458.Baktemur G., Keles D., Kara E. et al. Effects of Genotype and Nutrient Medium on Obtaining Haploid Plants through Ovary Culture in Cucumber // Molecular Biology Reports. – 2022. – Vol. 49, № 6. – Pр. 5451–5458.Bednarek P.T., Orłowska R., Mankowski D.R. et al. Glutathione and Copper Ions as Critical Factors of Green Plant Regeneration Efficiency of Triticale In Vitro Anther Culture // Frontiers in Plant Science. – 2022. – Vol. 13. – Art. 926305. DOI: 10.3389/fpls.2022.926305.Bednarek P.T., Orłowska R., Mankowski D.R. et al. Glutathione and Copper Ions as Critical Factors of Green Plant Regeneration Efficiency of Triticale In Vitro Anther Culture // Frontiers in Plant Science. – 2022. – Vol. 13. – Art. 926305. DOI: 10.3389/fpls.2022.926305.Deng Y., Tang B., Zhou X. et al. Direct Regeneration of Haploid or Doubled Haploid Plantlets in Cucumber (Cucumis sativus L.) through Ovary Culture // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. – 2020. – Vol. 142, № 2. – Pр. 253–268.Deng Y., Tang B., Zhou X. et al. Direct Regeneration of Haploid or Doubled Haploid Plantlets in Cucumber (Cucumis sativus L.) through Ovary Culture // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. – 2020. – Vol. 142, № 2. – Pр. 253–268.Diao W.P., Jia Y.Y., Song H. et al. Efficient Embryo Induction in Cucumber Ovary Culture and Homozygous Identification of the Regenetants Using SSR Markers // Scientia Horticulturae. – 2009. – Vol. 119, № 3. – Pр. 246–251.Diao W.P., Jia Y.Y., Song H. et al. Efficient Embryo Induction in Cucumber Ovary Culture and Homozygous Identification of the Regenetants Using SSR Markers // Scientia Horticulturae. – 2009. – Vol. 119, № 3. – Pр. 246–251.Dong Y.Q., Zhao W.X., Li X.H. et al. Androgenesis, Gynogenesis, and Parthenogenesis Haploids in cucurbit species // Plant Cell Reports. – 2016. – Vol. 35. – Pр. 1991–2019.Dong Y.Q., Zhao W.X., Li X.H. et al. Androgenesis, Gynogenesis, and Parthenogenesis Haploids in cucurbit species // Plant Cell Reports. – 2016. – Vol. 35. – Pр. 1991–2019.Elmeer K.E.S. Factors Regulating somatic embryogenesis in plants // Somatic Embryogenesis and Gene Expression. – New Delhi: Narosa Publ., 2013. – Pр. 56–81.Elmeer K.E.S. Factors Regulating somatic embryogenesis in plants // Somatic Embryogenesis and Gene Expression. – New Delhi: Narosa Publ., 2013. – Pр. 56–81.Erol M.H., Sarı N. The Effect of Ovule-ovary Culture and Spermidine-putrescine Applications on Haploid Embryo Induction of Cucumber (Cucumis sativus L.) // Alatarim. – 2019. – Vol. 18, № 2. – Pр. 108–117.Erol M.H., Sarı N. The Effect of Ovule-ovary Culture and Spermidine-putrescine Applications on Haploid Embryo Induction of Cucumber (Cucumis sativus L.) // Alatarim. – 2019. – Vol. 18, № 2. – Pр. 108–117.Gemes-Juhasz A., Balogh Р., Ferenczy А., Kristof Z. Treatment on In Vitro Gynogenesis Induction in Cucumber (Cucumis sativus L.) // Effect of Optimal Stage of Female Gametophyte and Heat Plant Cell Reports. – 2002. – Vol. 21. – Pр. 105–111.Gemes-Juhasz A., Balogh Р., Ferenczy А., Kristof Z. Treatment on In Vitro Gynogenesis Induction in Cucumber (Cucumis sativus L.) // Effect of Optimal Stage of Female Gametophyte and Heat Plant Cell Reports. – 2002. – Vol. 21. – Pр. 105–111.Golabadi M., Ghanbari Y., Keighobadi K., Ercisli S. Embryo and Callus Induction by Different Factors in Ovary Culture of Cucumber // Journal of Applied Botany and Food Quality. – 2017. – Vol. 90. – Pр. 68–75. DOI: 10.5073/JABFQ.2017.090.010.Golabadi M., Ghanbari Y., Keighobadi K., Ercisli S. Embryo and Callus Induction by Different Factors in Ovary Culture of Cucumber // Journal of Applied Botany and Food Quality. – 2017. – Vol. 90. – Pр. 68–75. DOI: 10.5073/JABFQ.2017.090.010.Li J.W., Si S.W., Cheng J.Y. et al. Thidiazuron and Silver Nitrate Enhanced Gynogenesis of Unfertilized Ovule Cultures of Cucumis sativus // Biologia Plantarum. – 2013. – Vol. 57, № 1. – Pр. 164–168.Li J.W., Si S.W., Cheng J.Y. et al. Thidiazuron and Silver Nitrate Enhanced Gynogenesis of Unfertilized Ovule Cultures of Cucumis sativus // Biologia Plantarum. – 2013. – Vol. 57, № 1. – Pр. 164–168.Shalaby T.A. Factors Affecting Haploid Induction through In Vitro Gynogenesis in Summer Squash (Cucurbita pepo L.) // Scientia Horticulturae. – 2007. – Vol. 115, № 1. – Pр. 1–6. DOI: 10.1016/j.scienta.2007.07.008.Shalaby T.A. Factors Affecting Haploid Induction through In Vitro Gynogenesis in Summer Squash (Cucurbita pepo L.) // Scientia Horticulturae. – 2007. – Vol. 115, № 1. – Pр. 1–6. DOI: 10.1016/j.scienta.2007.07.008.Skalova D., Ondrej V., Dolezalova I. et al. Polyploidization Facilitates Biotechnological In Vitro Techniques in the Genus Cucumis // BioMed Research International. – 2010. – Vol. 2010. – Art. 475432. DOI: 10.1155/2010/475432.Skalova D., Ondrej V., Dolezalova I. et al. Polyploidization Facilitates Biotechnological In Vitro Techniques in the Genus Cucumis // BioMed Research International. – 2010. – Vol. 2010. – Art. 475432. DOI: 10.1155/2010/475432.Sriskandarajah S., Sameri М., Lerceteau-Köhler Е., Westerbergh А. Increased Recovery of green doubled haploid plants from barley anther culture // Crop Science. – 2015. – Vol. 55, № 6. – Pр. 2806–2812. DOI: 10.2135/cropsci2015.04.0245.Sriskandarajah S., Sameri М., Lerceteau-Köhler Е., Westerbergh А. Increased Recovery of green doubled haploid plants from barley anther culture // Crop Science. – 2015. – Vol. 55, № 6. – Pр. 2806–2812. DOI: 10.2135/cropsci2015.04.0245.Tang F. In Vitro Production of Haploid and Doubled Haploid Plants from Pollinated Ovaries of Maize (Zea mays) // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. – 2006. – Vol. 84. – Pр. 233–237.Tang F. In Vitro Production of Haploid and Doubled Haploid Plants from Pollinated Ovaries of Maize (Zea mays) // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. – 2006. – Vol. 84. – Pр. 233–237.Tantasawat P.A., Sorntip A., Poolsawat O. et al. Evaluation of Factors Affecting Embryo-like Structure and Callus Formation in Unpollinated Ovary Culture of Cucumber (Cucumis sativus) // International Journal of Agriculture and Biology. – 2015. – Vol. 17, № 3. – Pр. 613–618. https://doi.org/10.17957/ijab.17.3.14.257.Tantasawat P.A., Sorntip A., Poolsawat O. et al. Evaluation of Factors Affecting Embryo-like Structure and Callus Formation in Unpollinated Ovary Culture of Cucumber (Cucumis sativus) // International Journal of Agriculture and Biology. – 2015. – Vol. 17, № 3. – Pр. 613–618. https://doi.org/10.17957/ijab.17.3.14.257.Thiruvengadam M., Chung I.M. Phenolic Compound Production and Biological Activities from In Vitro Regenerated Plants of Gherkin (Cucumis anguria L.) // Electronic Journal of Biotechnology. – 2015. – Vol. 18, № 4. – Pр. 295–301.Thiruvengadam M., Chung I.M. Phenolic Compound Production and Biological Activities from In Vitro Regenerated Plants of Gherkin (Cucumis anguria L.) // Electronic Journal of Biotechnology. – 2015. – Vol. 18, № 4. – Pр. 295–301.Thiruvengadam M., Rekha K.T., Jayabalan N. et al. Effect of Exogenous Polyamines Enhances Somatic Embryogenesis via Suspension Cultures of Spine Gourd (Momordica dioica Roxb. ex. Willd.) // Australian Journal of Crop Science. – 2013. – Vol. 7, № 3. – Pр. 446–453.Thiruvengadam M., Rekha K.T., Jayabalan N. et al. Effect of Exogenous Polyamines Enhances Somatic Embryogenesis via Suspension Cultures of Spine Gourd (Momordica dioica Roxb. ex. Willd.) // Australian Journal of Crop Science. – 2013. – Vol. 7, № 3. – Pр. 446–453.Wędzony M., Forster B.P., Żur I. et al. Progress in Doubled Haploid Technology in Higher Plants // Advances in Haploid Production in Higher Plants. – 2009. – Pр. 1–33.Wędzony M., Forster B.P., Żur I. et al. Progress in Doubled Haploid Technology in Higher Plants // Advances in Haploid Production in Higher Plants. – 2009. – Pр. 1–33.Lee S.Y., Lee J.H., Kwon T.O. Selection of Salt-tolerant Doubled Haploids in Rice Anther Culture // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. – 2003. – Vol. 74. – Pр. 143–149.Lee S.Y., Lee J.H., Kwon T.O. Selection of Salt-tolerant Doubled Haploids in Rice Anther Culture // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. – 2003. – Vol. 74. – Pр. 143–149.Zeng A., Song L., Cui Y., Yan J. Reduced Ascorbate and Reduced Glutathione Improve Embryogenesis in Broccoli Microspore Culture // South African Journal of Botany. – 2017. – Vol. 109. – Pр. 275–280. DOI: 10.1016/j.sajb.2017.01.005.Zeng A., Song L., Cui Y., Yan J. Reduced Ascorbate and Reduced Glutathione Improve Embryogenesis in Broccoli Microspore Culture // South African Journal of Botany. – 2017. – Vol. 109. – Pр. 275–280. DOI: 10.1016/j.sajb.2017.01.005.Zhu Y., Sun D., Deng Y. Regeneration of double haploid plants from unpollinated ovary cultures of watermelon // Research Square. – 2019. – URL: https://www.researchsquare.com/article/rs-4797/v1/ (дата обращения: 12.02.2024). DOI: 10.21203/rs.2.14098/v1.Zhu Y., Sun D., Deng Y. Regeneration of double haploid plants from unpollinated ovary cultures of watermelon // Research Square. – 2019. – URL: https://www.researchsquare.com/article/rs-4797/v1/ (дата обращения: 12.02.2024). DOI: 10.21203/rs.2.14098/v1.Zieliński K., Krzewska M., Żur I. et al. The Effect of Glutathione and Mannitol on Androgenesis in Anther and Isolated Microspore Cultures of Rye (Secale cereale L.) // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. – 2020. – Vol. 140, № 3. – Pр. 577–592. DOI: 10.1007/s11240-019-01754-9.Zieliński K., Krzewska M., Żur I. et al. The Effect of Glutathione and Mannitol on Androgenesis in Anther and Isolated Microspore Cultures of Rye (Secale cereale L.) // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. – 2020. – Vol. 140, № 3. – Pр. 577–592. DOI: 10.1007/s11240-019-01754-9.Żur I., Dubas E., Krzewska M. et al. Glutathione Provides Antioxidative Defence and Promotes Microspore-derived Embryo Development in Isolated Microspore Cultures of Triticale (× Triticosecale Wittm.) // Plant Cell Reports. – 2019. – Vol. 38. – Pр. 195–209. DOI: 10.1007/s00299-018-2362-x.Żur I., Dubas E., Krzewska M. et al. Glutathione Provides Antioxidative Defence and Promotes Microspore-derived Embryo Development in Isolated Microspore Cultures of Triticale (× Triticosecale Wittm.) // Plant Cell Reports. – 2019. – Vol. 38. – Pр. 195–209. DOI: 10.1007/s00299-018-2362-x.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.